【简答题】
大肠杆菌阿拉伯糖的代谢调控相当复杂,不仅仅是相关基因在染色体上分散排列(如图13-3-38所示),还有调控蛋白。AraC既是正调控因子又是负调控因子,例如,在araBAD基因簇的调控中(图13-3-41A),当阿拉伯糖存在时(无葡萄糖),与位点1结合的AraC蛋白可使转录比缺乏AraC蛋白的基本转录水平增强100倍。在缺乏阿拉伯糖时与位点2结合的AraC蛋白抑制araBAD基因的转录,与缺乏AraC蛋白的基础转录水平相比较大,约相差10倍。在位点2的负调控和位点1的正调控的综合作用下意味着阿拉伯糖的加入导致arcBAD基因簇转录将提高1000倍。 在位点1处结合的正调控看来是直接的,因为这个位点位于启动子附近,估计使RNA聚合酶更容易结合或激活转录起始复合物。在位点2的结合会使你更加迷惑,位点2位于转录起始点上游270核苷酸处,这样远距离的调控作用更容易使人联想到真核细胞中的增强子。为了更容易地了解位点2的抑制机制,移动整个调控区把它置于grlK基因前,这个基因编码半乳糖激酶,比araBAD基因簇编码的酶更容易分析研究。 为了确定两个araC结合位点间区域的重要性,可按图13-3-41A所示的那样在插入点插入或缺失一段核苷酸。在缺乏阿拉伯糖时启动子的活性研究是通过将细菌在特殊指示平板上进行培养来实践的,如果启动了,活性被完全抑制,菌落是白色的,如果半乳糖激酶产生,则菌落为红色,然后对照着在两个结合位点间的序列插入或缺失多少个核苷酸的图示上(图13-3-41B),画线培养相应的细菌突变体,结果发现,红线和白线是相互散置的。 这些实验结果可以区别三种远距离抑制的潜在机制。 (1)DNA结构上的改变可以使抑制位点向转录位点分散,使启动子不适合RNA聚合酶的结合。 (2)蛋白可以在抑制位点以这样的方式协作,即附加因子不断加入,产生连锁反应,覆盖了整个启动子,由此封闭了转录过程。 (3)DNA可成环以致于蛋白在很远处的抑制位点与DNA结合就可影响转录起始点的蛋白(或DNA)。 你所得的结果证实了哪一种机制,如何解释红色及白色的条纹?
参考答案:
参考解析:
举一反三