简单介绍下如何完成细菌的转化实验? 2.E.coli细胞中是否存在 F因子以及在细胞中的存在方式不同,可把大肠杆菌分成哪几种类型? 3. 请比较 (1)F+ ×F- 接合;(2)Hfr×F- 接合; (3)F'与 F- 接合三种接合的结果有何不同? 4. 什么叫 F'细胞,它有哪些应用? 5. 简述病毒或噬菌体基因组的特点。 6. 试述细菌的溶源性周期主要经历哪些过程? 7. 能在接合后检出重组子,必须要有一个可供选择用的供体标记基因,这样可以认出重组子。另一方面,在选择重组子的时候,为了不选择供体细胞本身,必须防止供体菌株的继续存在,换句话说,供体菌株也应带有一个特殊的标记,能使它自己不被选择。例如供体菌株是链霉素敏感的,这样当结合体 (conjugants)在含有链霉素的培养基上生长时,供体菌株就被杀死了。现在要问:如果一个 Hfr菌株是链霉素敏感的,你认为这个基因应位于染色体的那一端为好,是在起始端还是在末端? 8. 环境条件能使 T 偶数噬菌体 (T-evenphages)吸附到寄主细胞上,这个环境条件就是色氨酸的存在。这种噬菌体称为色氨酸需要型 (C)。然而某些噬菌体突变成色氨酸非依赖型 (C+ )。有趣的是,当用 C和 C+ 噬菌体感染细菌时,将近一半的色氨酸非依赖型子代在进一步的实验中表现为基因型 C。你如何解释这个发现? 9. 基因型 ACNRX菌株,作为外源 DNA 用来转化基因型acnrx的菌株得到下列类型: AcnRx,acNrXaCnRx,AcnrX.aCnrx请问被转化的基因顺序是什么? 10. 一野生型菌株抽提出来的 DNA 来转化一个不能合成丙氨酸 (ala)、脯氨酸 (pro)和精氨酸 (arg)的突变型菌株,产生不同转化类型的菌落,其数如下: 8400 ala+pro+arg+ 840 ala+pro-arg- 2100 ala+pro-arg+ 1400 ala+pro+arg- 420 ala-pro+arg+ 840 ala-pro+arg- 840 ala-pro-arg+ 问:(1)这些基因间的图距为多少? (2)这些基因的顺序如何? 11. 利用中断杂交技术,检查了5个 Hfr菌株 (1,2,3,4,5),想知道这几个菌株把若干不同基因 (F,G,O,P,Q,R,S,W,X,Y)转移到一个 F-菌株的顺序。结果发现,各个 Hfr菌株都以自己特有的顺序转移,如下所示: (各品系只记下最初转移进去的6个基因) Hfr菌株 1 2 3 4 5 第一 Q Y R OQ 转 第二 S G S PW 移 第三 R F Q RX 顺 第四 P O W SY 序 第 五 O P XQ 第六 F R Y WF 问:(1)这些 Hfr菌株的原始菌株的基因顺序如何? (2)为了得到一个最高比例的 Hfr重组子,在接合后应该在受体中选择哪个供体标记基因? 提示:Hfr品系是环状 DNA。 12. 用 P1进行普遍性转导,供体菌是pur+nad+pdx- ,受体菌是pur-nad-pdx+ 。转导后选择具有pur+ 的转导子,然后在100个pur+ 转导子中检定其他供体菌基因有否也转导过来。所得结果如下表: 基因型 菌落数 nad+pdx+ 1 nad+phx- 24 nad-phx+ 50 nad-pdx- 25 合计 100 问: 1 pur和nad的共转导 (cotransduction)频率是多少? 2 pur和pdx的共转导频率是多少? 3 哪个非选择性座位最靠近pur? 4 nad和pdx在pur的同一边,还是在它的两侧? 5 根据你得出的基因顺序,解释实验中得到的基因型的相对比例。 5基因顺序:pur-pdx-nad。