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【简答题】

raf-1基因编码Ser/Thr蛋白激酶可能在脊椎动物发育中起重要作用。在果蝇中,当这个基因的同系物缺失时,胚胎能正常发育过囊胚期,但此后的发育开始异常,产生一缺少后面四片段的平截胚胎。在脊椎动物中,成纤维细胞生长因子(FGF)增进中胚层诱导和后期发育。据认为Raf-1蛋白与FGF触发信号传导途径。Raf-1蛋白有一个Ser/Thr激酶区,即C末端半分子和一个在氨基末端的调节区,该区除非收到正确信号,否则会抑制激酶活性。
为了检验Raf-1的作用,你构建出一个你希望是负显性的cDNA,在ATP结合区改变了一主要的残基。这一突变了的cDNA编码的蛋白无激酶活性,命名为NAF(没活性的Raf)。从Raf-1cDNA到NAF、cDNA中制得RNA,分别注射或混合注射到二细胞期的蛙胚中以判断对蛙发育的影响,结果在表16-3-45中,某些注射后产生的元尾表型很明显(见图16-3-45)。

表16-3-45 R-1和NAF RNA注入2细胞胚胎

注入 存活总数 表 型
正常 短尾 其他不正常
raf-I RNA
NAF RNA
raf-I and NAF RNA
Water
uninjected 94
80
93
101
80 75%
40%
73%
92%
99% 0%
36%
5%
0%
0% 25%
24%
22%
8%
1%

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