影响免疫电泳技术的因素有:电场强度,溶液pH,离子强度,电渗等。
其特点是提高了敏感性及反应速度,并可将带电性不同的组分区分开。
当抗原或抗体过量时,形成的复合物分子小,而且会发生再解离,使浊度反而下降,这就是高剂量钩状效应。
免疫比浊测定的影响因素是:抗原抗体的比例,抗体的质量,抗原抗体反应的溶液,增浊剂的使用。
单向扩散试验检测时的注意点:①抗血清必须特异性强、效价高、亲和力强、在良好的条件下保存。②每次测定都必须做标准曲线。③每次测定时必须用质控血清做质控。④注意双环现象(出现了两种抗原性相同成分)。⑤应用单克隆抗体测量多态性抗原时,测定值偏低,用多克隆抗体测量单克隆病时,测定值偏高。
可溶性抗原和相应特异性抗体以合适的比例结合,在反应体系中出现不透明的沉淀物,这种抗原体反应称为沉淀反应。包括单向免疫扩散、双向免疫扩散、对流免疫电泳、免疫电泳、免疫比浊等。
免疫电泳技术实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验。它的原理是将凝胶扩散置于直流电场中,在一定条件下,抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子,在电场中向异相电荷的电极移动,所带净电荷量越多,颗粒越小,泳动速度越快,反之则慢。由于电流加速了抗原、抗体的运行速度,缩短了两者结合的时间,加快了沉淀现象的产生。当有多种带电荷的物质电泳时,由于净电荷不同,而区分成不同区带,使抗原决定簇不同的成分得以区分。