荧光是某些物质受到一定波长光的激发后，再发射出的波长大于激发光的光，刺激的能量为光能；化学发光是化学发光反应中底物产生的能量刺激激发态分子发光。

吖啶酯是一种直接化学发光剂，在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用，直接参与发光反应，在化学结构上有产生发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体。在碱性条件下被H₂O₂氧化时，发出波长为470nm的光，具有很高的发光效率，其激发态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。三联吡啶钌[RU（bpy）₃]²⁺是电化学发光剂，它和电子供体三丙胺（TPA）在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。鲁米诺及其衍生物以及AMP-PD属于酶促反应发光剂，利用标记酶的催化作用来发光。

电化学发光免疫分析是20世纪80年代末期发展起来的一种新型的化学发光免疫分析方法，其发光信号不是通过启动化学发光剂或激发化学发光底物使其从激发态回到基态的过程产生信号，主要是根据三联吡啶钌和三丙胺在电场触发下产生发光的化学发光反应，最大特点是通过电场来精确控制整个分析过程。

急诊心功能检测项目包括肌酸激酶同工酶、肌红蛋白、肌钙蛋白等，最佳的检测方法为电化学发光免疫分析。ECLI具有高敏感性可达pg/ml或pmol水平；特异性强，重复性好；试剂稳定有效期长，无毒害，无污染；测定范围宽；操作简单，耗时短，易于自动化等优点。适用于甲状腺激素、肿瘤标志物、感染性疾病、糖尿病、心脏标志物、过敏性疾病、治疗药物监测等。

吖啶酯类标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团，在发光免疫分析过程中直接参与发光反应。

化学发光的首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须释放出光子或将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子发光，故必须产生足够的激发能是重要条件。

在碱性环境中，HRP对鲁米诺和过氧化氢的反应起催化作用，鲁米诺发光强度取决于形成酶标记抗原-抗体复合物量的多少。

在电化学发光免疫分析系统中，磁性微粒为固相载体包被抗体（抗原），用三联吡啶钌标记抗体（抗原），在反应体系内待测标本与相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌标记抗体复合物，这时将上述复合物吸入流动室，同时引入TPA缓冲液。当磁性微粒流经电极表面时，被安装在电极下面的电磁铁吸引住，而未结合的标记抗体和标本被缓冲液冲走。与此同时电极加压，启动电化学发光反应，使三联吡啶钌和TPA在电极表面进行电子转移，产生电化学发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。[Ru（bpy）₃]²⁺衍生物与免疫球蛋白结合的分子比超过20仍不会影响抗体的可溶性和免疫活性，分子量小，空间位阻小，即便小分子核酸也能标记。

化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。某些物质（发光剂）在化学反应时，吸收了反应过程中所产生的化学能，使反应的产物分子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态，当电子从激发态回复到基态时，以发射光子的形式释放出能量，这一现象称为化学发光。化学发光效率决定于生成激发态产物分子的化学激发效率（ψCE）和激发态分子的发射效率（ψEM）。化学发光反应的发光效率、光辐射的能量大小以及光谱范围，完全由发光物质的性质所决定，每一个发光反应都具有其特征性的化学发光光谱和不同的化学发光效率。

影响化学发光标记的因素有：发光剂的选择，被标记蛋白质的性质，标记方法的选择，原料比，标记率，温度，纯化与保存。