为了保证抗原抗体在最适比例条件下进行反应,达到最大沉淀反应的效果,就必须对抗原和抗体最佳工作浓度做出选择。将抗原稀释法和抗体稀释法结合起来就是方阵滴定法,又称为棋盘格法。
平板法是将抗体或抗血清混入0.9%琼脂糖内,未凝固前倾注成平板,然后在上打孔,将抗原加入孔中,放37℃让其自由扩散,24~48小时后可见孔周围出现沉淀环,测定环的直径或面积计算标本中待测抗原的浓度。
免疫固定电泳技术是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其他体液。
免疫电泳用于纯化抗原和抗体成分分析;免疫固定电泳用于M蛋白鉴定和脑脊液中寡克隆蛋白的检测;火箭电泳多用于放射自显影技术。
免疫电泳用于纯化抗原和抗体成分分析;免疫固定电泳用于M蛋白鉴定和脑脊液中寡克隆蛋白的检测;火箭电泳多用于放射自显影技术。
制备亲和层析柱选择琼脂糖珠4B;聚乙二醇是增浊剂;琼脂糖是双向免疫扩散试验中常用的支持物;常用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行抗体纯度的鉴定。
终点法是在抗原抗体反应达到平衡时,即复合物形成后作用一定时间,通常是30~60分钟,复合物浊度不再受时间的影响,但又必须在聚合产生絮状沉淀之前进行浊度测定。速率法是在抗原抗体结合反应的过程中,在单位时间内两者结合的速度。速率法是测最大反应的速度,即反应达到顶峰时的峰值。抗原抗体结合反应在几十秒内得血结果,峰值的高低与抗原的量成正比,峰值出现的时间和抗体浓度、抗原抗体的亲和力直接相关。速率法的灵敏度和特异性都比终点法好。
免疫电泳用于纯化抗原和抗体成分分析;免疫固定电泳用于M蛋白鉴定和脑脊液中寡克隆蛋白的检测;火箭电泳多用于放射自显影技术。
与免疫浊度法测定密切相关的因素有:抗原抗体的比例,当比例合适时二者充分结合,形成的沉淀最多;抗体的质量,如抗体的特异性、效价、亲和力以及抗体类型等;反应溶液的pH、离子强度等;增浊剂,可促进免疫复合物的形成。
火箭免疫电泳的原理是将单项扩散试验与电泳相结合的免疫扩散技术。